Southern Blot实验中,洗液、预杂交液、杂交液都保持在同一温度有什么好处
问答/166℃/2025-03-11 01:38:44
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在Southern blot试验中,预杂交的目的是将硝酸纤维素膜上的非特异结合DNA位点使用与目的DNA同源性较差的分子（鲑鱼DNA或者牛血清等）进行封闭,洗膜则是为了将未能特异性结合的DNA分子洗脱；预杂交、杂交两者处理温度相同,可以确保在目标DNA的杂交温度（约为Tm值-10℃）条件下,非特异性位点能够充分封闭,从而提高实验准确性；洗膜温度可以与杂交温度相同,也可进行梯度洗脱,总的来说,离子强度大,洗脱温度高,则实验精确性越高.